基于16S rRNA测序与代谢组学探究银翘散治疗儿童过敏性紫癜的作用机制

作者：熊维霖; 胡晓磊; 朱庆军; 宋纯东; 王晴雯; 郭庆寅^*

来源：中药药理与临床, 2023, 39(12): 89-95.

DOI：10.13412/j.cnki.zyyl.20221108.012

• 银翘散
• 过敏性紫癜
• 16S rRNA
• 代谢组学
• 微生态
• 儿童

目的:银翘散为临床治疗风热伤络型过敏性紫癜(Henoch-Schonlein Purpura, HSP)的经典方剂，但其作用机制不明确，本研究采用唾液代谢组学和16S rRNA测序研究其治疗风热伤络型HSP的作用机制。方法:收集在我院儿科门诊或住院治疗的，符合纳入标准的初治风热伤络型HSP患儿20例并采集唾液标本(治疗前组),银翘散治疗2 w后再次采集唾液(治疗后组),同时征集20例健康正常儿童作为健康对照组。采用超高效液相色谱-质谱联用(UHPLC-QE-MS)技术进行各组唾液代谢谱分析，多变量统计分析筛选差异代谢物；采用Illumina NovaSeq测序平台对各组唾液微生物进行16S rRNA高通量测序，通过α多样性和β多样性分析，揭示各组中物种组成和群落结构的差异，筛选出差异性菌群；采用Spearman相关分析差异性菌群与差异性代谢物之间的相关性。结果:与健康对照相比，治疗前治疗组唾液菌群丰富度(ACE和Chao指数)和多样性(Shannon和Simpson指数)下降，但无显著性差异(P>0.05);与治疗前比较，治疗后治疗组唾液菌群丰富度和多样性明显升高(P<0.05)。变形菌门(Proteobacteria)、厚壁菌门(Firmicutes)、拟杆菌门(Bacteroidota)、梭杆菌门(Fusobacteriota)占所有菌群的90%以上，其中厚壁菌门是三组中最丰富的。使用线性判别分析(LDA)效应大小(LEfSe),显示治疗前组拟杆菌门显著高于健康对照组；与治疗前组相比，治疗后组c＿Negativicutes、o＿Veillonellales＿Selenomonadales、f＿Veillonellaceae、g＿Veillonella、p＿Actinobacteriota、c＿Actinobacteria显著升高，g＿Porphyromonas、f＿Porphyromonadaceae、C＿Bacilli显著降低。治疗前组与健康对照组比较，有9种差异性代谢产物，涉及花生四烯酸代谢等6种代谢途径；治疗前组与治疗后组比较，有6种差异性代谢产物，涉及组氨酸代谢和苯丙氨酸代谢等4种代谢途径。治疗前组与健康对照组中拟杆菌门(Bacteroidota)与苯乳酸呈明显正相关(P<0.05),与花生四烯酸呈负相关(P<0.05);治疗前组与治疗后组中，卟啉单胞菌属(Porphyromonas)与氢化肉桂酸呈正相关(P<0.05)。结论:儿童风热伤络型HSP口腔微生态发生了改变，HSP唾液样本中门水平上以拟杆菌门为主，花生四烯酸可能是HSP的生物标志物。银翘散可能通过改变卟啉单胞菌属(Porphyromonas)和韦荣氏球菌属(Veillonella)丰度以及通过组氨酸代谢、苯丙氨酸代谢等通路改善口腔微生态，进而达到治疗效果。

• 单位
  第一临床医学院; 河南中医药大学