六味地黄丸对秀丽隐杆线虫AD模型线粒体损伤的保护作用

作者：张金凤; 佟玉良; 王加朋; 苏婷; 赵德萍; 于浩; 左坤; 朱紫悦; 金美玲; 张宁; 雷霞^*

来源：中国实验方剂学杂志, 2023, 1-9.

• 阿尔茨海默病
• 六味地黄丸
• 秀丽隐杆线虫
• 线粒体损伤

目的 探讨六味地黄丸提取物(LW)对秀丽隐杆线虫(Caenorhabditiselegans，C.elegans)阿尔茨海默病(Alzheimerdisease，AD)模型线粒体损伤的保护作用。方法 使用转染人源β淀粉样蛋白(Aβ)1-42基因的秀丽隐杆线虫为AD模型，实验设空白组、模型组、二甲双胍组(50mmol·L-1)，及六味地黄丸低、中、高(1.04、2.08、4.16g·kg-1)剂量组。行为学方法观察线虫5-羟色胺(5-hydroxytryptamine，5-HT)的敏感性，蛋白免疫印迹法(WesternBlot)法检测线虫体内Aβ表达，ATP试剂盒检测线虫体内总ATP含量，线粒体膜电位检测试剂盒法(JC-1法)检测线粒体膜电位，实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-timePCR，RT-PCR)法检测Aβ表达基因(Amy-1)，超氧化物歧化酶-1(SOD-1)、线粒体转录因子A同源基因(HMG-5)、线粒体动力相关蛋白1(Drp1)、线粒体分裂蛋白1(Fis1)mRNA的表达。结果 六味地黄丸提取物能够降低AD模型线虫对外源5-HT的超敏感性(P<0.05)，延缓AD模型线虫神经元中由于Aβ过度表达产生毒性所引起的对外源性5-HT超敏感性的AD样病理特征；与空白组比较，模型组Aβ蛋白和Amy-1mRNA的表达升高(P<0.01)，SOD-1与HMG-5mRNA表达下降(P<0.01)，Drp-1与Fis-1mRNA表达升高(P<0.01)，线粒体膜电位水平下降(P<0.05)，ATP含量下降(P<0.01)；与模型组比较，阳性药、六味地黄丸中剂量和高剂量组Aβ蛋白和Amy-1mRNA的表达降低(P<0.01)，SOD-1与HMG-5mRNA表达升高(P<0.01)，Drp-1mRNA表达降低(P<0.05)，Fis-1mRNA表达降低(P<0.01)，线粒体膜电位水平升高(P<0.05)，ATP含量升高(P<0.01)。结论 六味地黄丸提取物可能通过增强线粒体抗氧化能力，保护线粒体DNA，减少线粒体分裂碎片化，修复受损的线粒体，回调线粒体膜电位，恢复神经元ATP水平，减轻Aβ沉积导致的神经元损伤。

• 单位
  南京中医药大学; 黑龙江中医药大学; 佳木斯大学