忽地笑α-葡萄糖苷酶编码基因的分子克隆与原核表达

作者：李宜奎; 李洁; 程丽; 钱彬彬; 汪仁^*

来源：分子植物育种, 2019, 17(11): 3562-3569.

DOI：10.13271/j.mpb.017.003562

• 忽地笑
• α-葡萄糖苷酶
• 分子克隆
• 原核表达

利用RACE技术从忽地笑(Lycoris aurea (L’Hér.) Herb.)花瓣中克隆获得一个α-葡萄糖苷酶编码基因Lau Agl。该基因cDNA全长2 810 bp,开放阅读框为2 613 bp,编码含有870个氨基酸残基的LauAgl蛋白质。LauAgl蛋白质氨基酸序列具有α-葡萄糖苷酶特征性的保守结构域和天冬氨酸残基组成的活性中心,其N端含有一个由21个氨基酸组成的信号肽序列,还具有一些蛋白质糖基化的潜在位点(N-X-S/T共有序列)。LauAgl蛋白质与石刁柏、椰子、油棕等其他植物的α-葡萄糖苷酶的氨基酸序列一致性达到63%以上。利用pET表达系统,通过截掉其N-端信号肽序列,可以实现LauAgl蛋白质在大肠杆菌中的诱导表达。本研究为Lau Agl蛋白质的功能鉴定及其在忽地笑种子萌发与生长发育中的作用研究提供理论基础。

• 单位
  江苏省中国科学院植物研究所