花鲈结合珠蛋白基因的克隆及其在哈维氏弧菌感染下的表达分析

作者：乔丹; 丁斐斐; 李长红^*; 陈炯

来源：农业生物技术学报, 2019, 27(11): 2042-2051.

• 结合珠蛋白(Hp)
• 花鲈
• 哈维氏弧菌
• 糖基化
• 基因表达

结合珠蛋白(haptoglobin, Hp)又称触珠蛋白,主要由肝脏合成,在感染、损伤及炎症诱导的急性期反应(acute phase response, APR)中发挥重要作用。本研究从花鲈(Lateolabrax japonicus)转录组测序结果中获得其Hp基因(LjHp)全长cDNA序列(GenBank No. MK820673)。LjHp由2 285个核苷酸组成,包含1个大的ORF,预测编码1个由309个氨基酸组成、分子量约为33.82 kD的前体蛋白,N端22个残基为信号肽。序列分析显示,LjHp具有鱼类Hp的典型特征,与欧洲海鲈(Dicentrarchus labrax)Hp氨基酸同源性高达76.8%;系统进化树分析表明,鱼类Hp形成1个大簇,LjHp与黄鳝(Monopterus albus)Hp形成1个小簇。LjHp mRNA主要在健康花鲈肝脏中表达,其在哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)感染后,在花鲈的肝脏、脾脏和头肾中表达量显著增加(P<0.05)。Western blot分析表明,LjHp在花鲈血清中存在N-糖基化修饰,并且在哈维氏弧菌感染后血清中LjHp的含量显著上调(P<0.05)。以上结果显示,LjHp mRNA及其蛋白的表达与哈维氏弧菌感染密切相关,揭示其可能作为一个正急性期蛋白参与花鲈抵抗细菌感染。本研究结果为进一步研究鱼类Hp的功能及其在病原菌感染引起的APR中的分子机制提供基础资料。

• 单位
  宁波大学