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摘要
目的:利用溶血反应、热原反应和细胞毒性反应实验了解羊脱细胞真皮基质(acellular dermal matrix,ADM)在动物体内外的毒性反应强度。方法:溶血反应:分别制作交联型和非交联型羊ADM的浸提液,为交联组和非交联组;并设置阳性对照组10 m L灭菌注射用水,阴性对照组10 m L 0.9%氯化钠溶液。将新鲜抗凝稀释兔血加入实验组和对照组试管中,离心后取上清液测量吸光度值,计算溶血度。热原实验:按照条件入选16只新西兰兔,分为初试A,B两组各3只和复试C,D两组各5只。分别将交联与未交联的两种ADM浸提液注射入两组新西兰兔体内,注射后每隔0.5 h测量一次体温,共测量6次,以6次中最高一次减去正常体温即为该兔的体温升高度数。据此判断是否符合生物制品热原实验的评价标准。MTT实验:收集对数期的小鼠成纤维细胞细胞,种植于含有不同浓度羊ADM浸提液的培养基,测量吸光度值进行细胞活力测定。结果:实验A,B组溶血度均小于5%,热原反应测得新西兰兔体温升高之和低于1.8℃。MTT实验显示10%~90%羊ADM浸提液培养基对体外细胞的毒性为1级,100%的羊浸提液对体外细胞的毒性为2级,交联型与非交联型组的浸提液对体外细胞的毒性的无显著性差异(P>0.05)。均对体外细胞的增殖影响轻微。结论:羊ADM植入新西兰兔体内引起的溶血反应和热原反应在评价标准之内,在体外对细胞的增殖和活力影响不明显。
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单位内蒙古包钢医院; 中南大学湘雅医院; 包头医学院
