干扰hsa_circ_0004771对顺铂耐药胃癌细胞增殖、凋亡和迁移的影响

作者:王竞; 段志英; 杨明月; 朱秀芳; 霍晓辉; 范红云*
来源:中国临床药理学杂志, 2022, 38(14): 1633-1638.
DOI:10.13699/j.cnki.1001-6821.2022.14.014

摘要

目的 探讨hsa_circ_0004771对顺铂(DDP)耐药胃癌细胞增殖、凋亡和迁移的影响。方法 体外培养胃癌细胞HGC-27和顺铂耐药胃癌细胞HGC-27/DPP,用实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测hsa_circ_0004771和miR-149的表达水平。用双荧光素酶报告基因实验验证HGC-27/DPP细胞中hsa_circ_0004771和miR-149的调控关系。将HGC-27/DPP细胞分为hsa_circ_0004771小干扰RNA(si-hsa_circ_0004771)组(转染si-hsa_circ_0004771)、小干扰RNA阴性对照(si-NC)组(转染si-NC)、miR-149组(转染miR-149模拟物)、模拟对照序列(miR-NC)组(转染miR-NC)、si-hsa_circ_0004771+miR-149抑制剂(anti-miR-149)组(共转染si-hsa_circ_0004771和anti-miR-149)、si-hsa_circ_0004771+抑制剂阴性对照序列(anti-miR-NC)组(共转染si-hsa_circ_0004771和anti-miR-NC),用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法和克隆形成实验检测细胞的增殖情况,用流式细胞术检测细胞的凋亡情况,用划痕实验检测细胞的迁移情况。结果 HGC-27和HGC-27/DPP细胞中hsa_circ_0004771相对表达水平分别为1.00±0.00和3.60±0.20,miR-149相对表达水平分别为1.00±0.00和0.12±0.01,差异均有统计学意义(均P<0.05)。hsa_circ_0004771在HGC-27/DPP细胞中靶向调控miR-149。si-hsa_circ_0004771组、si-NC组、miR-149组、miR-NC组、si-hsa_circ_0004771+anti-miR-149组和si-hsa_circ_0004771+anti-miR-NC组的细胞抑制率分别为(54.03±2.38)%,0,(47.27±3.18)%,0,(17.65±1.25)%和(54.52±2.20)%,集落形成数分别为(44.67±1.25),(104.00±2.94),(54.33±2.49),(104.00±3.56),(91.33±3.86)和(45.00±1.63)个,凋亡率分别为(22.35±1.56)%,(8.31±0.46)%,(19.52±1.03)%,(8.10±0.44)%,(22.35±1.50)%和(13.48±0.80)%,划痕愈合率分别为(27.14±1.21)%,(64.82±2.41)%,(34.08±1.18)%,(65.02±2.43)%,(50.67±2.92)%和(27.15±1.35)%。si-hsa_circ_0004771组的上述指标与si-NC组比较、miR-149组的上述指标与miR-NC组比较、si-hsa_circ_0004771+anti-miR-149组的上述指标与si-hsa_circ_0004771+anti-miR-NC组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 hsa_circ_0004771在顺铂耐药胃癌细胞中表达升高,干扰其表达可能通过上调miR-149的表达,进而抑制顺铂耐药胃癌细胞的增殖和迁移,并诱导细胞凋亡。

  • 单位
    河北医科大学第一医院

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