摘要
目的检测M型瞬时受体电位通道8(melastatin-related transient receptor potential 8, TRPM8)在慢性鼻窦炎、鼻息肉和对照组中鼻甲黏膜组织中表达及表达差异, 探讨在慢性鼻窦炎伴鼻息肉(CRSwNP)中TRPM8表达的意义。方法前瞻性纳入2019年2月至2020年1月在武汉大学人民医院耳鼻咽喉头颈外科行鼻内镜手术患者51例, 分为慢性鼻窦炎伴鼻息肉(CRSwNP)组17例、慢性鼻窦炎不伴鼻息肉(CRSsNP)组17例和对照组(单纯解剖上存在鼻中隔偏曲或鼻骨骨折的患者)17例。其中男性33例, 女性18例, 年龄为14~65(34.55±1.689)岁。利用免疫组织化学技术检测3组患者组织(CRSwNP组取息肉组织、CRSsNP组取钩突组织和对照组取中鼻甲组织)中TRPM8的表达及分布。根据免疫组织化学结果分析TRPM8表达与CRSwNP患者术前CT Lund-Mackay评分、鼻部症状视觉模拟量表(VAS)评分和鼻腔鼻窦结局测试20(SNOT-20)量表评分的相关性;利用原代细胞培养及实时定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫蛋白印迹法检测鼻息肉上皮细胞及中鼻道上皮细胞中TRPM8的mRNA及蛋白表达水平;收取3组临床标本制备成组织匀浆后加入人鼻腔上皮细胞系和原代正常鼻黏膜上皮细胞中刺激24 h, 随后利用蛋白免疫印迹技术检测TRPM8蛋白表达。采用SPSS 23.0及GraphPad Prism软件进行统计学分析, 两组间采用独立样本t检验, 相关性分析采用Spearman检验。结果与对照组相比, CRSwNP组中TRPM8表达明显上调(t=6.852, P<0.05), 同时蛋白主要表达在鼻黏膜上皮细胞中;CRSsNP组中TRPM8表达差异无统计学意义(t=1.980, P>0.05)。TRPM8表达与术前CT Lund-Mackay评分、VAS评分和SNOT-20均呈正相关(r=0.512, P<0.05;r=0.853, P<0.01;r=0.814, P<0.01);体外培养对照组中鼻道上皮细胞以及息肉上皮细胞后, 检测发现息肉上皮细胞中TRPM8的mRNA及蛋白表达水平明显高于对照组上皮细胞, 差异有统计学意义(t=8.845, P<0.05);相较于加入正常对照和慢性鼻窦炎组织匀浆而言, 加入鼻息肉组织匀浆的人鼻腔上皮细胞系(RPMI 2650)细胞中TRPM8表达增高。结论 TRPM8在鼻息肉上皮细胞中呈高表达且其表达量与患者VAS评分呈正相关, 提示TRPM8可能参与鼻息肉发病过程中鼻黏膜上皮细胞调控的发病机制。
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单位武汉大学人民医院