重组灵芝免疫调节蛋白(rLZ-8)单克隆抗体的制备及鉴定

作者：张淑芹; 梁重阳; 刘志屹; 戴璐; 张福明; 孙非

来源：中国免疫学杂志, 2012, 28(01): 41-44.

• 重组灵芝免疫调节蛋白(rLZ-8)
• 细胞融合
• 单克隆抗体
• 效价

目的:制备重组灵芝免疫调节蛋白(rLZ-8)单克隆抗体,为rLZ-8的药效学及药代动力学研究奠定基础。方法:以纯度99%的rLZ-8免疫BALB/c小鼠;应用常规的细胞融合技术建立一种能够稳定分泌抗rLZ-8单克隆抗体的杂交瘤细胞株;采用小鼠腹腔接种法制备腹水;Protein A Sepharose亲和层析柱在AKTA纯化仪上对抗体进行纯化;间接ELISA方法测定单克隆抗体的效价;Western blot胶片曝光方法对rLZ-8单克隆抗体特异性进行分析。结果:筛选出2株可特异性分泌抗rLZ-8单克隆抗体的杂交瘤细胞株。分别命名为clone13-2-3和clone11-4-4。其抗体亚型分别为IgG1亚型和IgG2a亚型。腹水抗体效价分别为1∶12 000和1∶7 500,细胞培养上清效价分别为1∶3 000和1∶2 800。Western blot检测证明这两株杂交瘤细胞所分泌的单克隆抗体均具有良好的特异性。结论:成功制备出较高效价和较高特异性的鼠抗rLZ-8的单克隆抗体。

• 单位
  吉林大学; 吉林大学第一医院