精液样本保存方式对精子DNA碎片率检测影响的实验研究

作者：黄诚; 陆碧玉; 代元平; 黄李霜; 杨金铃; 黄丽华; 陈大宇; 蔡稔; 严提珍^*

来源：现代检验医学杂志, 2023, 38(03): 180-183.

• 精子DNA碎片率
• 流式细胞术
• 样本保存

目的 研究精液样本新鲜度对精子DNA碎片率（DNA fragmentation index,DFI）检测结果的影响，探讨在实际工作中该如何正确保存样本。方法 随机选择38份2020年12月期间柳州市妇幼保健院生殖中心男科门诊日常送检的精液样本，采用流式细胞术（flow cyto metry,FCM）进行精子DFI检测，每个样本充分液化后混匀分成4等份，分为A,B,C和D共4组：A组当即检测，然后放置室温保存，每2h再测1次，共测得A1,A2,A3三组数据；B组放置2℃～8℃冰箱保存，每24h检测1次，连测3天，共获得B1,B2,B3三组数据；C组放置-20℃冰箱冷冻，每周解冻测1次，测完放回冰箱复冻，连测4周，共获得C1,C2,C3,C4四组数据；D组放-20℃冰箱冷冻，30天后解冻检测1次，获得D1组数据。将新鲜样本当即检测组(A1组)作为对照组，与其他组的DFI结果进行单因素配对t检验，验证样本在不同保存方式下的结果变化。结果 A1组DFI较A2,C1,C2,C3,C4和D组[14.33(5.72～22.94)%vs 14.68(6.72～22.54)%,14.59(6.52～22.66)%,14.73(6.62～22.95)%,14.91(6.89～22.93)%,14.96(7.20～22.72)%,14.65(6.85～22.45)%]，差异无统计学意义（t=-0.827,-1.003,-1.483,-1.834,-1.786,-0.844，均P>0.05）;A1组DFI低于A3,B1,B2,B3组[14.33(5.72～22.94)%vs 16.44(8.07～24.81)%,20.99(11.93～30.05)%,20.71(11.19～30.23)%,23.10(12.57～33.63)%]，差异具有统计学意义（t=-3.091,-6.172,-5.108,-6.056，均P<0.05）。结论 为保障精子DFI检测结果的可靠性，精液样本应在采集后2h内完成检测，样本在室温或2～8℃放置时间过长会使检测结果偏高，若需较长时间保存建议及时将新鲜样本放置-20℃冰冻保存，时长可达一个月。

• 单位
  柳州市妇幼保健院