美洲大蠊肠道产7-木糖紫杉烷糖基水解酶菌株的筛选及鉴定

作者：唐彬; 刘文彬; 李小波; 王宁; 金小宝

来源：生物技术通报, 2022, 38(03): 139-148.

DOI：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2021-0620

• 美洲大蠊肠道
• 7-木糖紫杉烷糖基水解酶
• 7-木糖-10-去乙酰基紫杉醇
• 10-去乙酰紫杉醇

旨在筛选美洲大蠊肠道具有产7-木糖紫杉烷糖基水解酶性能的内生菌，并对其进行生物学鉴定。以实验室保存的178株美洲大蠊肠道内生菌为研究对象，采用刚果红透明圈法和荧光显色法筛选产木聚糖酶菌株，进一步利用薄层色谱法筛选产7-木糖紫杉烷糖基水解酶菌株。在此基础上，选取一株高产7-木糖紫杉烷糖基水解酶菌株进行形态学、生理生化和分子生物学鉴定，并采用高效液相色谱法测定其对7-木糖-10-去乙酰基紫杉醇的转化率。结果显示，178株美洲大蠊肠道内生菌中有55株菌产木聚糖酶，其中8株链霉菌和2株贪铜菌可产生7-木糖紫杉烷糖基水解酶。高产菌株WA11-2-9经形态学特征、生理生化试验和16S rDNA序列分析鉴定为Streptomyces enissocaesilis。WA11-2-9可将7-木糖-10-去乙酰基紫杉醇转化为10-去乙酰巴卡亭Ⅲ和10-去乙酰紫杉醇，主要产物10-去乙酰紫杉醇的转化率为21.52%。美洲大蠊肠道内生菌WA 11-2-9(GenBank Accession：MZ411692)具有分泌7-木糖紫杉烷糖基水解酶的能力，它为后续生物转化制备紫杉醇奠定了坚实基础。

• 单位
  广东药科大学