转铁蛋白受体靶向分子探针99Tcm-T7的放射性标记及肿瘤显像研究

作者：肖晴; 潘芯; 李崇佼; 蒋亚群; 王怡春; 文兵; 雷萍; **^*

来源：国际放射医学核医学杂志, 2022, 46(04): 223-229.

DOI：10.3760/cma.j.cn121381-202110017-00167

• 受体, 转铁蛋白
• 肽类
• 分子探针
• 锝
• 同位素标记
• 放射免疫显像
• 单光子发射计算机体层摄影术
• 肿瘤细胞, 培养的
• 小鼠, 裸

目的制备靶向转铁蛋白受体(TfR)的多肽分子探针99Tcm-组氨酸-精氨酸-脯氨酸-酪氨酸-异亮氨酸-丙氨酸-组氨酸(简称99Tcm-T7), 并评估其在荷瘤裸鼠模型micro SPECT/CT显像中的效果。方法采用间接标记法, 在共配体N-三(羟甲基)甲基甘氨酸和乙二胺二乙酸的协同下, 制备99Tcm-T7。采用流式细胞术测定人胰腺癌PANC-1细胞和人乳腺癌MX-1细胞表面TfR的表达水平, 采用体外细胞结合及细胞竞争抑制实验评估99Tcm-T7体外结合TfR的亲合力及特异性。构建荷瘤裸鼠模型, 注射99Tcm-T7后进行micro SPECT/CT显像及生物学分布实验。采用离体组织放射性磷屏自显影成像及组织病理学检查, 观察TfR的表达情况。2组间的比较采用独立样本t检验。结果成功制备了分子探针99Tcm-T7, 其标记率>95%, 分别在与生理盐水、胎牛血清的混合液中孵育4 h后的放射化学纯度为(95.3±0.3)%和(90.6±0.4)%。流式细胞术实验结果显示, PANC-1细胞与TfR单克隆抗体的结合率为(98.9±0.1)%, 而MX-1细胞与TfR单克隆抗体的结合率为(0.2±0.1)%。体外细胞结合实验结果表明, PANC-1细胞与99Tcm-T7共孵育60 min后结合率达到峰值[(16.12±0.01)%], 高于MX-1细胞[(1.20±0.01)%], 且二者间的差异有统计学意义(t=28.67, P<0.001);细胞竞争抑制实验结果表明, PANC-1阻断组与99Tcm-T7的结合率降低至(2.40±0.01)%, 与PANC-1实验组的差异有统计学意义(t=26.91, P<0.001)。荷瘤裸鼠体内micro SPECT/CT显像结果显示, 99Tcm-T7可从血液中迅速清除, 主要通过肾脏排泄。PANC-1荷瘤裸鼠模型在注射99Tcm-T7后30 min时肿瘤轮廓显示清晰, 肿瘤/肌肉比值达2.80±0.22。生物学分布实验结果显示, 肿瘤及各脏器对99Tcm-T7的摄取[每克组织百分注射剂量率(%ID/g)]与显像结果一致, 且99Tcm-T7在PANC-1细胞中的摄取[(0.55±0.18)%ID/g]高于MX-1细胞[(0.16±0.11)%ID/g], 差异有统计学意义(t=6.42, P<0.001)。放射性磷屏自显影结果显示, 在注射99Tcm-T7 30 min后, 相较于MX-1细胞, PANC-1细胞显著摄取99Tcm-T7 ;在正常组织脏器中, 以肾脏摄取最为显著, 其次为肝脏。苏木精-伊红染色法及免疫组织化学染色法结果显示, 肿瘤实质内未见明显坏死, 在PANC-1细胞中TfR呈高表达, 而在MX-1细胞中TfR呈低表达。结论成功制备了靶向TfR的特异性多肽分子探针99Tcm-T7, 其在荷瘤裸鼠模型中具有良好的显像效能, 有望为在体监测肿瘤TfR的表达提供新的影像学手段。

• 单位
  华中科技大学同济医学院; 基础医学院; 武汉大学中南医院