摘要
目的:探究EB病毒潜在膜蛋白1(Epstein-barr virus latent membrane protein 1, EBV LMP1)对牙龈上皮细胞促炎因子的调控及机制。方法:0.05μg和0.2μg pSG-GFP-LMP1质粒转染Ca9-22细胞,分别于24 h和48 h后荧光显微镜下观察GFP在Ca9-22细胞中的表达情况,Real-time PCR和Western blot检测LMP1 mRNA和蛋白表达,确定转染是否成功。应用0.2μg pSG-GFP-LMP1质粒转染Ca9-22细胞,分别于24 h和48 h进行Real-time PCR和ELISA检测细胞中IL-8 mRNA和蛋白表达。应用0.05μg和0.2μg pSG-GFP-LMP1质粒转染Ca9-22细胞,48 h后Real-time PCR和ELISA检测细胞中IL-8 mRNA和蛋白表达,Western blot检测p-IκBα、IκBα、p-p65和p65蛋白表达。结果:pSG-GFP-LMP1质粒转染Ca9-22细胞基因高表达,转染成功。0.2μg质粒转染Ca9-22细胞24 h和48 h后,实验组IL-8 mRNA和蛋白表达均显著高于对照组(P<0.01)。0.05μg和0.2μg质粒转染Ca9-22细胞48 h后,实验组IL-8 mRNA和蛋白表达以及p-IκBα、p-p65和p65蛋白表达显著高于对照组(P<0.01),且随着剂量增大,表达增强,实验组IκBα蛋白表达显著低于对照组(P<0.01),且随着剂量增大,表达减弱。结论:EBV LMP1可能通过激活NF-κB磷酸化进而诱导Ca9-22细胞中IL-8的表达。
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