乳酸对非小细胞肺癌细胞线粒体自噬的影响

作者：王迦乐; 黄登亮; 张耀刚; 姜军^*

来源：中国高原医学与生物学杂志, 2023, 44(03): 164-171.

DOI：10.13452/j.cnki.jqmc.2023.03.003

• 低氧
• 乳酸
• 非小细胞肺癌
• A549细胞
• 自噬

目的 本研究旨在探讨乳酸对人非小细胞肺癌细胞线粒体自噬的影响。方法 将人正常肺上皮细胞(BEAS-2B)和非小细胞肺癌细胞(A549)分别给予常氧(21%O2)和低氧(1%O2)处理，测定细胞在常氧和低氧条件下的乳酸生成情况；用外源乳酸(0、5、10 mM)在常氧和低氧条件下分别处理BEAS-2B和A549细胞，应用qPCR法分析线粒体DNA拷贝数，用蛋白免疫印迹法检测LC3B、TOM20、HSP60蛋白水平；使用Mitotracker? Red(581/644 nm)、Lyso View Blue法检测线粒体及溶酶体共定位情况。结果 与常氧组相比，低氧组BEAS-2B和A549的乳酸生成量明显升高(P<0.05)。未用乳酸干预时，相比于常氧组，低氧组A549线粒体拷贝数明显增加(P<0.0001),BEAS-2B线粒体拷贝数明显减少(P<0.0001);用乳酸干预后，常氧组和低氧组A549线粒体拷贝数随乳酸浓度增加而减少，BEAS-2B线粒体拷贝数变化则呈相反趋势。与对照组相比，常氧组和低氧组经乳酸干预后，BEAS-2B、A549细胞中的LC3B-Ⅱ/Ⅰ比值增加，A549细胞中的HSP60、TOM20蛋白表达水平下降，而BEAS-2B细胞中的HSP60、TOM20蛋白表达水平无明显改变；在常氧和低氧条件下与对照组相比，Lac-10 mM组A549细胞线粒体和溶酶体荧光共定位增强，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 乳酸可以增强非小细胞肺癌细胞线粒体自噬功能。

• 单位
  中心实验室; 青海大学附属医院; 青海大学