摘要

采用5 L发酵罐对重组大肠杆菌E.coli BL21(DE3)/pET30-PFDH外源表达NADP+型甲酸脱氢酶进行高密度发酵研究。通过对培养基、溶氧控制、诱导温度、诱导pH、诱导种类和时机的系统优化,在DO-star补料方式下,甲酸脱氢酶发酵液的酶活达到56.9 U/mL,相对于优化前提高了47.8%。在此基础上,利用200 L中试发酵罐对甲酸脱氢酶重组菌进行放大培养及工艺验证,重复6个批次,平均菌体质量浓度和平均酶活达到201.1 g/L和52.3 U/mL。优化后的高密度发酵条件放大重复性好,具备产业化前景。