优化培养条件和裂解方法提高hRANKL在大肠杆菌内的表达（英文）

作者：车路阳; 郭志兰; 郭清华; 潘冰; 李晶哲; 刘长振; 黄鹏

来源：生物工程学报, 2017, 33(05): 849-862.

DOI：10.13345/j.cjb.160465

• RANKL
• 大肠杆菌
• 蛋白表达
• 骨质疏松

RANKL/RANK/OPG轴在骨代谢过程中起到中心调节作用,也是近年来骨相关疾病治疗研究的热点之一。RANKL蛋白在RANKL/RANK/OPG轴信号传递过程中起到关键作用,在骨代谢相关实验研究中用途广泛。但是,使用大肠杆菌Escherichia coli可溶表达重组人源RANKL蛋白(hRANKL)时产量远低于鼠源RANKL(mRANKL)。本研究通过将LB培养基pH值调整并稳定在7.5、降低诱导表达温度至16℃并优化细菌裂解条件,成功地将可溶hRANKL产量增加到了对照组的5-12倍。该方法有效提高了hRANKL在大肠杆菌中可溶表达的产量,同时也是研究重组蛋白在大肠杆菌内的可溶表达策略的有益尝试。

• 单位
  中国中医科学院医学实验中心; 中国人民解放军总医院