摘要

目的研究沉默神经元特异性烯醇酶(NSE)对小细胞肺癌(SCLC)细胞增殖和侵袭能力的影响。方法构建特异性siRNA质粒载体转染SCLC细胞,抑制NSE基因表达。Western blot检测NSE抑制效果,同时检测肺癌转移指标E-cadherin、nm23、VEGF表达变化。分别利用克隆形成实验、CCK-8法、流式细胞术和Transwell观察高表达NSE和沉默NSE后SCLC细胞的存活状况、增殖能力、细胞周期和侵袭能力的变化。结果成功构建siRNA质粒载体转染SCLC细胞,转染NSE-siRNA与siRNA-NC相比,NSE蛋白表达量明显下降。肺癌转移指标E-cadherin、nm23表达升高,VEGF降低。克隆形成实验提示,抑制NSE基因表达,不仅克隆数量显著减少,分子大小也明显减小。CCK-8法结果显示,抑制NSE基因表达能够显著抑制SCLC细胞增殖。流式细胞术显示,抑制NSE基因表达使S期细胞百分率显著降低。Transwell结果显示,抑制NSE基因表达使SCLC细胞穿膜能力减弱。结论 NSE特异性siRNA质粒载体转染SCLC细胞株可抑制SCLC细胞NSE基因表达,NSE基因下调对SCLC细胞克隆形成能力有明显的抑制作用,使其增殖能力下降,降低S期细胞百分率,抑制其体外侵袭能力。同时,肺癌转移相关指标E-cadherin、nm23表达升高,VEGF降低。

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