组成型表达粪产碱杆菌青霉素G酰化酶重组大肠杆菌发酵条件研究

作者：黄华; 苟斌全; 王永红; 储炬; 庄英萍; 张嗣良; 袁中一

来源：生物技术, 2006, (04): 57-62.

DOI：10.16519/j.cnki.1004-311x.2006.04.024

• 青霉素G酰化酶
• 组成型表达系统
• 质粒稳定性
• 葡萄糖 penicillin G acylase
• constitutive expression system
• plasmid stability
• glucose

目的:对重组大肠杆菌组成型表达粪产碱杆菌青霉素G酰化酶(AfPGA)进行了发酵条件研究。方法:在摇瓶和5L发酵罐中研究了(NH4)2SO4和葡萄糖浓度对质粒的分离稳定性及青霉素G酰化酶表达的影响。结果:该工程菌质粒具有分离不稳定性,培养基中无(NH4)2SO4时发酵过程中pH和糊精水解生成葡萄糖的浓度变化较小,细胞前期(0h-12h)的生长速率降低,质粒分离稳定性和青霉素G酰化酶的表达水平提高。发酵过程中维持低葡萄糖水平可以限制细胞的生长速率,提高质粒稳定性和促进青霉素G酰化酶的合成。采用混合碳源发酵,发酵培养基含糊精2g/L,12h后以1g/L.h恒速流加葡萄糖至35h,控制流加过程葡萄糖浓...

• 单位
  生物反应器工程国家重点实验室; 中国科学院上海生命科学院; 华东理工大学