利用乙醇-磷酸氢二钾双水相体系对白花蛇舌草(Hedyotis diffusa)总黄酮进行萃取分离。通过单因素实验分别考察了m(K2HPO4)、超声时间及超声温度对白花蛇舌草总黄酮萃取效果的影响,并用响应面法优化了萃取工艺。经优化后,白花蛇舌草总黄酮的最佳萃取条件为:m(K2HPO4)2.0g,超声时间37min,超声温度57℃。在此条件下,白花蛇舌草总黄酮的萃取率可高达99.45%。本方法精密度良好,准确度较高,可为白花蛇舌草总黄酮的高效萃取提供参考。