摘要
目的探讨巨细胞病毒(Cytomegalovirus,CMV)是否感染血管内皮细胞伴肾素表达。方法(1)用107pfu(空斑形成单位)/ml CMV临床分离株BI-5和实验室型CMV AD169分别与106腹主动脉内皮细胞和人脐静脉内皮细胞共同孵育,在23小时后、第3天、第7天、第10天和第14天分别收集培养上清200μl,第14天用PBS缓冲液洗细胞3次,收获细胞。每组实验均设培养液代替病毒液的无感染对照;(2)COBAS定量PCR检测培养上清中CMV DNA拷贝数;(3)PCR检测感染细胞中CMVpol基因;(4)RT-PCR、Real time RT-PCR和Western blot检测肾素在感染细胞内的表达。结果(1)BI-5和AD169感染静脉和动脉细胞后,其形态学变化相似,无细胞裂解病理效应;(2)AD169感染细胞不同时间培养上清中CMV DNA拷贝数无明显增加,BI-5呈增殖趋势;(3)BI-5感染动脉细胞CMV DNA拷贝数和肾素表达量均大于静脉细胞。结论临床分离株CMV以非裂解形式在血管内皮细胞持续存在并诱导肾素基因表达,血管内皮细胞分泌肾素可能是CMV感染引起心血管疾病的新机制。
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单位harvard university; Harvard medical school; harvard medical school; Beth Israel Deaconess Medical Center; Harvard Medical School; Massachusetts General Hospital