构巢曲霉几丁质酶ChiB的结构分析与重组表达

作者：赵静; 郭小利; 金盛宇; 王宇; 刘中华^*

来源：重庆理工大学学报：自然科学, 2022, 36(04): 268-273.

• 几丁质酶
• 结构分析
• 重组表达

真菌的细胞壁由几丁质、葡聚糖等成分构成，几丁质酶在真菌细胞壁的重构过程起到重要作用。分析显示，人类条件致病真菌构巢曲霉的几丁质酶B(Aspergillus nidulans Chitinase, AnChiB)属于糖基水解酶家族18 (glycosyl hydrolases family 18)二型(type II)几丁质水解酶。结构分析显示，AnChiB的N端18个氨基酸残基为信号肽，蛋白质三维结构为由8个α-螺旋和8个β-折叠组成的(β/α)8 TIM桶状结构，催化位点位于第4个β-折叠上；在第7个α-螺旋和β-折叠间存在一个插入序列，与桶状结构形成一条狭长的底物结合沟，底物结构位点延底物结合沟分布。本研究利用大肠杆菌(Escherichia coli)重组表达系统重组表达并纯化了AnChiB。酶学性质分析显示AnChiB能够水解晶体几丁质，最适pH为5。同时表达量分析显示AnChiB在构巢曲霉生长早期表达量升高，并在48 h达到最高峰。本研究表明AnChiB可能参与构巢曲霉生长过程中的细胞壁重构。

• 单位
  江苏省微生物与功能基因组学重点实验室; 南京师范大学; 生命科学学院