序列特异性短发夹状RNA逆转白血病多药耐药性研究

作者：杜伟廷; 刘斌; 顾东生; 韩之波; 刘鹏霞; 徐洁; 梁璐; 赵海丰; 卢士红; 杨仁池

来源：中国实验血液学杂志, 2009, 17(03): 563-567.

• RNA干扰
• 白血病
• 多药耐药
• shRNA

本研究旨在构建并筛选MDR1序列特异性短发夹状RNA干扰载体,研究其对K562/A02细胞的影响。采用脂质体介导方法,将含mdr1-sh RNA质粒转入K562/A02细胞,经G418筛选得到稳定表达细胞株,用实时定量RT-PCR和Western blot分别检测干扰后mdr1 mRNA水平及蛋白水平的表达变化,通过CCK8测定干扰后细胞对化疗药的敏感性变化,Rhodamine123外排实验检测P-gp功能的变化。结果发现:与对照组相比,4种MDR1-sh RNA载体均能显著下调P-gp的表达,其中508-526靶位点的shRNA作用效果最好。结论:筛选得到的MDR1-sh RNA载体能够显著下调MDR1的表达,逆转耐药表型,为后续进行的动物实验研究创立了条件。

• 单位
  北京协和医学院; 中国医学科学院; 实验血液学国家重点实验室