犬α-干扰素蛋白原核表达及条件优化

作者：李桂伟; 周庆民; 樊兴冬; 冯万宇; 秦博; 高俊峰

来源：中国畜牧兽医文摘, 2012, (10): 48-49+120.

• 犬
• α-干扰素基因
• 克隆
• 原核表达

根据GenBank发表的犬α-干扰素(IFN-α)基因核酸序列(EF990625),去掉信号肽后设计并合成1对引物,利用PCR技术从犬肝脏基因组DNA中扩增犬α-干扰素基因,并克隆至表达载体pBV220,经过PCR、酶切、测序鉴定后转化DH-5α、BL2、Rosetta原核表达系统,通过不同宿主菌及不同诱导时间等条件优化,确定蛋白在DH-5α宿主菌中诱导4h表达量最高,表达量约为32%。本试验的完成为蛋白的进一步纯化奠定了基础。

• 单位
  黑龙江省兽医科学研究所