miR-9-5P靶向CDH1、CTNNA1和ITGA6对脉络膜黑色素瘤细胞功能的影响

作者：应曼曼; 张晓楠; 刘然; 宁宏^*

来源：中国医科大学学报, 2020, 49(10): 893-898.

• 脉络膜黑色素瘤
• miR-9-5p
• CDH1
• CTNNA1
• ITGA6

目的探讨miR-9-5P对脉络膜黑色素瘤细胞增殖、凋亡及迁移、侵袭的调控作用,并探寻其发挥作用的靶基因CDH1,CTNNA1和ITGA6。方法体外给予脉络膜黑色素瘤细胞转染阴性对照(NC)和miR-9-5p mimics。采用RTCA实时增殖实验检测细胞的增殖情况;EDU实验进一步检测细胞的增殖变化;流式细胞技术检测细胞的凋亡变化;Transwell实验观察细胞迁移和侵袭能力的变化情况;Targetscan生物信息学网站分析预测miR-9-5P的靶基因,并通过GO分类和KEGG富集分析找到与迁移和侵袭相关靶基因;Western blotting检测CDH1蛋白表达情况。结果 RTCA实时增殖实验结果显示,miR-9-5p能够抑制脉络膜黑色素瘤细胞MUM-2B (t=6.925,P <0.05)及MUM-2C (t=4.762,P <0.05)的增殖;EDU实验结果显示,miR-9-5p能够抑制脉络膜黑色素瘤细胞MUM-2B (t=4.779,P <0.05)和MUM-2C (t=4.514,P <0.05)的增殖;流式细胞检测结果表明,miR-9-5p能够促进脉络膜黑色素瘤细胞MUM-2B (t=7.385,P <0.05)和MUM-2C (t=4.893,P <0.05)的凋亡;Transwell实验结果显示,miR-9-5p能够抑制细胞的迁移和侵袭;生物信息学预测及分析得出与细胞迁移侵袭相关的3个miR-9-5p的靶基因CDH1,CTNNA1和ITGA6;Western blotting证明CDH1是miR-9-5p的靶基因。结论 miR-9-5p能抑制脉络膜黑色素瘤细胞的增殖、迁移和侵袭,促进脉络膜黑色素瘤细胞的凋亡,并通过调节CDH1,CTNNA1和ITGA6表达发挥调控作用。

• 单位
  中国医科大学附属第一医院