家蚕B类清道夫受体BmSCRB8基因的克隆及表达

作者：赵羽卒; 张奎; 唐梅; 徐曼; 李重阳; 潘光照; 申利; 崔红娟; 杨丽群

来源：生物工程学报, 2016, 32(10): 1408-1421.

DOI：10.13345/j.cjb.160023

• 家蚕
• BmSCRB8
• 表达谱
• 多克隆抗体
• 亚细胞定位

B类清道夫受体在动脉粥样硬化及其他心血管疾病的形成或抑制,机体免疫防御,凋亡细胞清除等生理过程中起着重要的作用。克隆了家蚕B型清道夫受体家族的一个成员BmSCRB8基因,通过RACE技术获得BmSCRB8的c DNA全长为2 668 bp,其ORF为1 704 bp,编码567个氨基酸,通过在线预测其蛋白分子量为63.87 k Da,等电点为6.06。采用RT-PCR方法得到了BmSCRB8的时空表达谱,结果表明BmSCRB8在家蚕各组织以及血液各时期均有表达,且在脂肪体中表达量最高,变态发育时期表达量较高。原核表达获得BmSCRB8重组蛋白,并经由蛋白纯化、免疫小鼠后制备得到家蚕BmSCRB8多克隆抗体。同时构建了BmSCRB8真核表达载体并转染家蚕胚胎细胞系。免疫荧光及过表达结果显示BmSCRB8主要定位于细胞膜上,Western blotting结果显示免疫小鼠后所得到的抗血清可特异性识别BmSCRB8蛋白。

• 单位
  西南大学; 家蚕基因组生物学国家重点实验室