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摘要
目的基于对小鼠脾脏长链非编码RNA(lncRNA)、信使RNA(mRNA)表达谱的检测,探讨中药党参增强衰老小鼠免疫功能的分子机制。方法将100只昆明种小鼠随机分为对照组、模型组和党参低、中、高剂量组(5、10、15 g·kg-1);采用每日颈背部皮下注射D-半乳糖溶液(1.25 mg·g-1)建立衰老小鼠模型;党参组每日按上述剂量灌胃给药,给药体积20 mL·kg-1,对照组和模型组给予等量生理盐水;连续造模、给药42 d。给药结束后,测定脾脏质量和体质量,计算脾脏脏器系数;采用HE染色法对脾脏组织进行病理学观察,以透射电镜观察脾脏组织超微结构;采用基因芯片技术筛选组间差异表达的lncRNAs和mRNAs,并对差异基因进行通路富集分析;选取组间差异表达的共同lncRNAs和mRNAs进行lncRNA-mRNA共表达网络构建,并采用实时荧光定量PCR法对网络中的基因表达进行验证。结果与对照组比较,模型组小鼠的脾脏质量和脏器系数明显降低(P<0.01);脾脏组织出现病理改变,淋巴细胞发生变异、自噬及凋亡;共有96个lncRNAs和65个mRNAs在衰老后发生了显著变化;Enpp6、Cped1、Galnt15基因表达上调。与模型组比较,党参低、中、高剂量组小鼠的脾脏质量和脏器系数均明显升高(P<0.05,P<0.01);党参对衰老小鼠脾脏组织病理变化及细胞超微结构有明显改善作用;共有623个lncRNAs和435个mRNAs在高剂量党参干预后出现表达差异;差异基因的KEGG通路富集主要与免疫过程、免疫疾病相关,包括同种异体移植物排斥反应、移植物抗宿主病、自身免疫性甲状腺疾病、抗原处理及呈递等;党参高剂量组的Enpp6、Cped1、Galnt15基因表达下调(P<0.01)。结论党参对衰老小鼠脾脏具有一定的保护作用,lncRNA-mRNA共表达网络可能在党参增强衰老小鼠免疫过程中发挥重要作用。
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单位甘肃中医药大学; 基础医学院
