摘要
目的研究高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对宫颈癌干性基因OCT4、Sox2和Nanog的作用。方法构建HMGB1过表达质粒及干扰HMGB1表达的特异性siRNA,将上述重组质粒和(或)siRNA转染到宫颈癌细胞中。采用Western blot和流式细胞术检测HMGB1上调(或抑制)表达后对上述干细胞标志物表达的影响。免疫组织化学法检测HMGB1、OCT4、Sox2和Nanog在66例宫颈组织中的表达并分析相关性。结果 (1)结果显示HMGB1编码区全长为648 bp,其与GV230真核表达系统构建出HMGB1过表达载体,同时筛选出干扰效率的最高的siRNA-HMGB1-1来进行后续实验;(2)与空载体组和HMGB1低表达组相比,HMGB1过表达组细胞株中干细胞标志物OCT4、Sox2和Nanog蛋白表达和比例明显增高,差异具有统计学意义(均P<0.05);HMGB1低表达时,Nanog、OCT4和Sox2蛋白的表达和比例明显降低,差异具有统计学意义(均P<0.05);(3)在宫颈鳞癌组织中HMGB1、OCT4、Sox2和Nanog蛋白阳性表达明显高于慢性宫颈炎组,HMGB1的表达与干细胞标志物的表达呈正相关。结论 HMGB1能够调节宫颈癌干性基因OCT4、Sox2和Nanog的表达,可能是抗肿瘤治疗的潜在靶点。
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单位湖北医药学院; 武汉大学中南医院; 襄阳市第一人民医院