通过定向进化技术提高角蛋白酶的热稳定性研究

作者：傅岩; 张铁鹰^*; 孙英霞; 李松育

来源：动物营养学报, 2021, 33(10): 5887-5894.

• 角蛋白酶
• 定向进化
• 热稳定性

本试验旨在通过定向进化技术提高角蛋白酶的热稳定性,以拓展角蛋白酶在饲料工业的适用性。试验采用易错PCR方法对地衣芽孢杆菌CP-16的角蛋白酶进行定向进化,筛选获得耐温性好的突变体,并对其进行酶学性质研究与结构功能分析。结果表明,从5 000个突变体中获得3株正向角蛋白酶突变体A307V/S346T、R70G、N245K,其角蛋白酶热稳定性得到了提高。酶学性质研究发现,角蛋白酶突变体R70G热稳定性最强,在75℃热处理5 min后残留酶活性达30.65%,而野生型角蛋白酶热处理5 min后残留酶活性仅1.06%。由此可见,本研究成功获得热稳定性较好的角蛋白酶突变体,拓展了角蛋白酶的适用性,为耐热角蛋白酶开发和相关基因信息探索提供了参考。

• 单位
  中国农业科学院北京畜牧兽医研究所; 动物科学学院; 动物营养学国家重点实验室; 山西农业大学