BDNF-AS基因及其突变体对HepG2细胞增殖和相关信号通路的影响

作者：董安妮; 祝立权; 周品一; 周勇; 郭大伟^*

来源：现代肿瘤医学, 2019, 27(09): 1495-1499.

• BDNF-AS
• 肝癌细胞
• 增殖
• 信号通路

目的:探讨BDNF-AS基因对肝癌细胞HepG2增殖的作用,以及对细胞内信号通路的影响。方法:采用BDNF-AS过表达质粒或BDNF-AS与BDNF基因完全互补序列缺失突变质粒转染肝癌细胞系HepG2,建立过表达BDNF-AS及其突变体的稳转细胞系,采用qRT-PCR方法检测HepG2细胞中BDNF-AS和BDNF mRNA水平,采用Western blot检测细胞中BDNF蛋白水平,采用EdU掺入实验评价细胞增殖情况,采用Western blot方法检测细胞内相关信号通路的活化情况。结果:稳定表达BDNF-AS及其突变体的细胞其BDNF-AS水平显著上调,而只有稳定表达BDNF-AS的细胞其BDNF mRNA水平显著下调,细胞增殖受到抑制。各组细胞BDNF蛋白水平无显著差异。各组细胞中PDK1和PKC底物的磷酸化水平上调,而过表达BDNF-AS组与突变组之间有差异。各组细胞中CK2底物的磷酸化水平下调,而过表达BDNF-AS组与突变组之间无显著差异。结论:HepG2细胞中稳定表达的BDNF-AS可能通过与BDNF基因的完全互补序列调控BDNF mRNA表达水平。稳定表达的BDNF-AS通过干扰CK2底物的磷酸化影响HepG2细胞的增殖能力,并且可能通过促进PDK1、PKC底物的磷酸化,影响HepG2细胞的其他生物学行为。

• 单位
  中国医科大学; 中国医科大学附属第四医院