分泌IL-10的B细胞诱导Tregs细胞的机制研究

作者：赵艳; 曹国琴; 赵思淇; 林江^*

来源：国际免疫学杂志, 2019, (03): 246-250.

• 白细胞介素-10
• B细胞
• 调节性T细胞
• CD4＋T细胞

目的 探讨分泌白细胞介素(interleukin,IL)-10的B细胞诱导CD4＋T细胞向调节性T细胞(regulatory T cells,Tregs)转化的机制。方法 免疫磁珠法分离C57BL/6J小鼠脾脏B细胞,CD40L抗体刺激B细胞48 h,培养43 h时,向培养液中加入脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)＋佛波酯(phorbol-12-myristate-13-acetate,PMA)＋离子霉素＋莫能霉素,逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测IL-10 mRNA表达水平。免疫磁珠法分离C57BL/6J小鼠脾脏CD4＋T细胞,根据培养条件不同,将细胞分成四组,对照(Control)组；共培养(Co-culture)组；非接触培养(Transwell)组；IL-10拮抗(Anti-IL-10)组。培养72 h后,流式细胞术检测CD4＋CD25＋Foxp3＋的百分比,酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测细胞培养上清液中IL-10蛋白水平。结果 与未刺激的B细胞相比,B细胞经刺激后IL-10 mRNA水平显著增加,差异具有统计学意义(t＝3.130,P<0.05)；流式结果显示,Co-culture组CD4＋CD25＋Foxp3＋的百分比较Control组、Transwell组显著增加,差异具有统计学意义(q值分别为2.338,5.650,P值均<0.05),Transwell组CD4＋CD25＋Foxp3＋的百分比明显高于Anti-IL-10组(q＝15.091,P<0.05)；Co-culture组细胞培养上清液中IL-10的蛋白水平明显高于其他三组,差异具有统计学意义(q值分别为10.870,5.193,10.170,P值均<0.05)。此外,Anti-IL-10组培养上清液中IL-10的蛋白水平与Transwell组比较差异具有统计学意义(q＝4.978,P<0.05)。结论 B细胞通过分泌IL-10诱导CD4＋T细胞向Tregs细胞转化,并且细胞间接触起到协同效应。

• 单位
  哈尔滨医科大学附属第四医院