变异链球菌乳酸脱氢酶与霍乱毒素B亚单位嵌合表达质粒的构建和表达

作者：张燕; 刘建国; 陈筑; 马欣荣; 唐琳; 吴家媛; 张剑; 管晓燕

来源：牙体牙髓牙周病学杂志, 2012, (07): 371-374+406.

DOI：10.15956/j.cnki.chin.j.conserv.dent.2012.07.004

• 变异链球菌
• 乳酸脱氢酶
• 霍乱毒素B亚单位
• 原核表达质粒 streptococcus mutans
• lactate dehydrogenase
• cholera toxin B subunit
• prokaryotic expression vector

目的:构建含变异链球菌乳酸脱氢酶(LDH)和霍乱毒素B亚单位(CTB)嵌合原核表达质粒,并诱导表达融合蛋白。方法:应用PCR技术扩增LDH编码基因ldh和CT编码基因ctxB,定向克隆至原核表达质粒pET32a(+)上,通过限制性内酶切、PCR和序列测定分析鉴定后转化大肠杆菌BL21(DE3),并经IPTG诱导表达融合蛋白。结果:PCR扩增得到了ldh和ctxB;构建的质粒pET-LDH/CTB经KpnⅠ、XhoⅠ双酶切和目的基因PCR检测,均得到1.4 kb大小的片段,与预计目的基因片段大小相同;质粒pET-LDH/CTB中插入的ldh序列与GeneBank中ldh比较同源性为98%,ctx...

• 单位
  中国科学院成都分院; 遵义医科大学; 滨州医学院附属医院