萸连丸对结肠炎小鼠脾脏Treg细胞PD-1/PD-L1表达的调节作用

作者:黄莉; 张哲言; 黄佳琦; 葛巍; 王海燕; 刘端勇; 赵海梅*; 李燕珍*
来源:时珍国医国药, 2023, 34(09): 2054-2058.

摘要

目的 探明萸连丸对溃疡性结肠炎小鼠脾脏Treg细胞PD-1/PD-L1表达的调节作用。方法 采用经典的DSS诱导溃疡性结肠炎小鼠模型。雄性SPF级BALB/c共40只,随机平均分为正常组、模型组、模型+萸连丸组、模型+美沙拉嗪组,除正常组外都给予DSS复制溃疡性结肠炎模型。造模后,模型+萸连丸组给予0.5g/kg萸连丸溶液灌胃,模型+美沙拉嗪组给予0.3g/kg美沙拉嗪溶液灌胃,正常组与模型组给予相同容积的生理盐水灌胃。记录小鼠体重、粪便粘稠度、便血情况;分离结肠并测量其结肠长度和重量,计算肠重指数;ELISA法检测结肠组织中IL-2、IL-17A的表达水平;分离脾脏,流式细胞术检测各组小鼠脾脏Treg细胞及其PD-1/PD-L1的表达水平;Western blot法检测Raptor、TSC1、TSC2的表达水平。结果 与模型组相比,模型+萸连丸组小鼠体重明显增加(P<0.05)、结肠长度显著恢复(P<0.01)、结肠重量以及肠重指数明显减轻(P<0.05);结肠组织炎性细胞浸润减少,黏膜损伤恢复;IL-2、IL-17A表达水平显著降低(P<0.01);脾脏中CD4+CD25+细胞水平显著升高(P<0.01),CD4+CD25+Foxp3+PD-1+细胞水平显著下降(P<0.01),CD4+CD25+Foxp3+、CD4+CD25+Foxp3+PD-L1+呈升高趋势(P<0.05);结肠组织中Raptor蛋白表达水平下降,TSC1与TSC2表达水平上调(P<0.05)。结论 萸连丸可能通过增加小鼠脾脏Treg细胞水平并调节其PD-1/PD-L1表达而有效治疗溃疡性结肠炎。