稳表达人HSP72的人脐带间充质干细胞株的构建

作者：王珍; 赵昌林; 骆敏翔

来源：中国当代医药, 2016, 23(26): 4-8.

• HSP72
• 人脐带间充质干细胞
• 慢病毒载体
• 转染

目的构建含人HSP72的慢病毒,筛选获得稳定表达HSP72的hUC-MSC细胞系。方法采用PCR方法从MGC fully sequenced human HSPAIA cDNA中调取HSP72基因的完整序列,利用双酶切及体外重组的方法获得pLV-HSP72-EGFP(2A)质粒,经PCR、测序方式鉴定成功后,对病毒进行包装。用病毒感染hUC-MSC,并用Puro进行抗性筛选可稳定表达HSP72的hUC-MSC细胞系。结果构建的pLV-HSP72-EGFP(2A)测序结果与GenBank收录序列一致,包装得到pLV-HSP72-EGFP(2A)病毒,筛选获得稳定表达HSP72的hUC-MSC细胞系,ELISA方法检测显示获得的细胞株可过表达HSP72。结论构建了获得稳定表达HSP72的hUC-MSC细胞系。

• 单位
  广州中医药大学祈福医院