长链非编码RNA ZNF528-AS1促进乳腺癌他莫昔芬耐药及进展转移

作者：张建树; 张瀚文; 赵文静^*

来源：山东大学学报(医学版), 2023, 61(01): 17-26.

• 乳腺癌
• ZNF528-AS1
• 他莫昔芬耐药
• 肿瘤干性
• 进展转移

目的 探讨长链非编码RNA ZNF528-AS1对乳腺癌他莫昔芬耐药及进展转移的影响及潜在调控机制。方法 利用RNA-seq高通量测序技术分析乳腺癌他莫昔芬耐药细胞/成瘤组织与亲本细胞/成瘤组织间差异表达的lncRNA,筛选与乳腺癌他莫西芬耐药相关的候选lncRNA,利用实时定量PCR(qRT-PCR)技术验证候选lncRNA的表达。通过脂质体转染乳腺癌细胞，构建过表达及敲低ZNF528-AS1的细胞模型。利用细胞增殖实验、克隆形成实验、成球实验、5-乙炔基-2′-脱氧尿嘧啶核苷(EdU)实验检测ZNF528-AS1对乳腺癌细胞增殖、肿瘤干性及他莫昔芬耐药性的影响。Transwell迁移和侵袭实验检测ZNF528-AS1对乳腺癌细胞转移能力的影响。利用RNA-seq高通量测序及生物信息学分析技术寻找ZNF528-AS1的下游调控通路，并通过Western blotting及细胞功能实验等进行验证。结果 RNA-seq高通量测序分析筛选出了在他莫昔芬耐药细胞/成瘤组织与亲本细胞/成瘤组织间差异表达的lncRNAs。qRT-PCR实验结果证实了差异lncRNA的表达，并发现ZNF528-AS1在他莫昔芬耐药细胞中的表达上调最为明显。在乳腺癌细胞中过表达ZNF528-AS1能够提高细胞的增殖水平、克隆形成能力、肿瘤干性及对他莫昔芬的耐药性。此外，过表达ZNF528-AS1可增强乳腺癌细胞的迁移及侵袭能力。相应地，在乳腺癌细胞中敲低ZNF528-AS1能够降低细胞的增殖、他莫昔芬耐药性、肿瘤干性、迁移及侵袭等能力。RNA-seq高通量测序结合生物信息学分析结果显示，过表达ZNF528-AS1能够参与调控转化生长因子-β(TGF-β)信号通路。Western blotting结果证实ZNF528-AS1能够同时激活经典和非经典TGF-β信号通路。TGF-β通路抑制剂SB431542能够逆转ZNF528-AS1过表达增强的细胞增殖、迁移及侵袭能力。结论 ZNF528-AS1能够促进乳腺癌他莫昔芬耐药及进展转移，其作用机制可能与激活TGF-β通路有关。

• 单位
  山东大学齐鲁医院