Rv2031c、38kDa及融合蛋白CFP10-ESAT6用于结核病血清学诊断的评价

作者：余琴; 林楠; 张爱洁; 徐伟; 刘英杰; 万康林

来源：中国病原生物学杂志, 2017, 12(05): 397-401.

DOI：10.13350/j.cjpb.170504

• 结核病
• 抗原表达
• 血清学诊断

目的对Rv2031c、38kDa以及融合蛋白CFP10-ESAT6三种结核分枝杆菌抗原和抗原的混合物进行检测效能评价,筛选最佳抗原并分析其应用价值。方法以结核分枝杆菌标准株H37Rv菌株基因组为模板,PCR扩增目的基因;利用pET-30a、pET-32a载体构建重组质粒,在宿主E.coli BL21(DE3)细胞中诱导表达,利用His标签亲和镍柱纯化重组蛋白。分别用单种重组蛋白和几种蛋白混合后包被酶标板,采用ELISA对129份血清(39份结核病患者血清和90份健康者血清)进行检测。结合受试者工作特征曲线法计算不同抗原和混合抗原的最佳临界值(Cut-off value)包被浓度,得出检测的灵敏度、特异度和曲线下面积,对其诊断效能和应用价值进行综合评价。结果以Rv2031c、38kDa和CFP10-ESAT6为包被抗原的ELISA法检测相应抗体的灵敏度分别为41.0%,51.3%和46.2%,特异度分别为90.0%、88.9%和79.1%,曲线下面积分别为0.640、0.761和0.690,以3种蛋白混合物为包被抗原的3项指标分别为66.7%、77.8%和0.746。结论 Rv2031c、38kDa以及融合蛋白CFP10-ESAT6 3种抗原混合物的诊断效能较好,具有一定的临床应用价值。

• 单位
  北京市朝阳区疾病预防控制中心; 传染病预防控制国家重点实验室; 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所