摘要

为了明确苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis, Bt)几丁质酶Chi73的特性和功能,本研究从Bt kurstaki HD-73菌株中克隆了几丁质酶基因chi73,并对其进行了原核表达;随后对表达的重组几丁质酶Chi73的酶学特性、杀虫活性和抑菌活性开展了研究。结果表明,在大肠杆菌中正确表达了大小为77 kDa的重组几丁质酶Chi73。以胶体几丁质为底物时,该酶的最适反应温度为60℃,最适pH为7.0,Zn2+和SDS对酶活力有明显的抑制作用。Chi73能显著抑制棉铃虫2龄幼虫的生长,其抑制率为94.37%。同时,对Bt Cry1Ac毒素有明显的增效作用,使Bt Cry1Ac毒素对棉铃虫2龄幼虫的LC50由27.39μg/mL降低至14.49μg/mL。此外,Chi73对白菜黑斑病菌、葡萄白腐病菌和棉花枯萎病菌均表现出明显的抑制作用。可见,Bt几丁质酶在杀虫增效和抑制真菌方面具有一定的应用潜力。

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