美洲型与欧洲型PRRSV双重RT-PCR检测方法的建立

作者：高雅; 武欣欣; 蒋小玲; 贺晓霜; 肖兴^*; 周双海^*

来源：北京农学院学报, 2021, 36(04): 76-80.

DOI：10.13473/j.cnki.issn.1002-3186.2021.0415

• 猪繁殖与呼吸综合征病毒
• 美洲型
• 欧洲型
• 双重RT-PCR
• 高敏感性

【目的】为了建立一种具有高敏感性的能够区分猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲型与欧洲型毒株的快速检测方法。【方法】从引物浓度与退火温度先对美洲型与欧洲型PRRSV的单项RT-PCR方法分别进行条件筛选与优化,之后对其双重RT-PCR方法进行条件筛选与优化,再进行特异性与敏感性试验和临床样品检测。【结果】建立的美洲型与欧洲型PRRSV双重RT-PCR检测方法不能检出猪瘟病毒与猪流行性腹泻病毒等当前流行较广的猪源RNA病毒,对美洲型与欧洲型PRRSV的检测灵敏度分别是66,40 copies/μL。此方法对2020年5个猪场的200份血清样品的检测结果显示,美洲型与欧洲型PRRSV的个体阳性率分别为44.0%和0,与单项RT-PCR方法检测结果完全一致。【结论】建立了一种高敏感性的美洲型与欧洲型PRRSV双重RT-PCR检测方法。

• 单位
  北京农学院