斑节对虾PmML1和PmML2基因的鉴定及表达分析

作者：符丹凤; 刘洪涛^*; 杨明秋; 何玉贵^*

来源：热带生物学报, 2022, 13(05): 440-450.

DOI：10.15886/j.cnki.rdswxb.2022.05.003

• 斑节对虾
• ML基因
• 克隆
• 组织表达

为进一步了解ML家族基因在斑节对虾先天免疫中的作用，采用PCR和RACE方法克隆到斑节对虾(Penaeus monodon)2个ML家族基因PmML1和PmML2，并对其进行生物信息学分析，同时通过实时荧光定量PCR技术分析2个ML家族基因在斑节对虾各组织的表达分布。结果显示：PmML1的开放阅读框(Open Reading Frame, ORF)为462 bp，编码153个氨基酸；PmML2的ORF为471 bp，编码156个氨基酸。2个基因都具有1个典型的ML家族蛋白结构域。多重比对结果显示，2个基因的ML结构域与组成3对二硫键的半胱氨酸残基位置都相对保守。氨基酸序列对比结果显示，PmML1和PmML2之间的相似性仅为42.37%。PmML1与日本囊对虾(Marsupenaeus japonicus)的ML蛋白MjML4的相似性最高，比例高达91.5%,PmML2与凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)的ML蛋白相似性最高，比例高达88.46%。系统进化分析结果显示，PmML1和PmML2存在于2个不同的分支，说明2个基因的进化相对独立，证明本研究中鉴定到的是2个不同的基因。实时荧光定量PCR结果显示，PmML1在对虾眼柄中的表达量最高，其次为肠、胃、心、鳃、肌肉和肝胰腺，在血细胞的表达水平最低；PmML2在眼柄中表达量最高，其次为肠、鳃、胃、血细胞、心、肝胰腺和肌肉，在肌肉中的表达水平最低。眼柄是重要的神经内分泌调节器官，推测PmML1和PmML2可能在斑节对虾神经内分泌调控等过程中发挥重要作用。

• 单位
  海南省水产技术推广站; 海南省海洋与渔业科学院