干扰HOTTIP对卵巢癌细胞SKOV3细胞侵袭、迁移能力及凋亡的影响

作者：赵迪; 黄馨禾; 车建华; 谭文华^*

来源：国际遗传学杂志, 2018, 41(02): 73-78.

• HOTTIP
• 卵巢肿瘤
• SKOV3细胞
• 细胞周期
• 细胞凋亡

目的研究干扰HOTTIP(HOXA transcript at the distal tip)的表达对卵巢癌细胞系SKOV3细胞侵袭、迁移能力及凋亡的影响。方法选取人正常卵巢癌上皮细胞IOSE80和人卵巢癌细胞SKOV3检测其中HOTTIP的表达情况。在确定HOTTIP在SKOV3细胞中高表达后,用慢病毒将干扰HOTTIP的shRNA转染进SKOV3细胞,构建HOTTIP的稳定敲减克隆。再分别构建阴性对照shRNA组(转染阴性对照质粒的克隆)和空白的对照组(未经转染的人卵巢癌SKOV3细胞),用PCR凝胶电泳及real-time PCR法检测3组细胞的HOTTIP表达,以确定转染效率。随后,Transwell小室及划痕实验检测干扰HOTTIP对细胞侵袭迁移能力的影响。Western印迹法检测干扰HOTTIP对凋亡相关通路蛋白表达的影响。结果干扰HOTTIP可使SKOV3细胞的划痕愈合率及细胞侵袭数目显著下降,使促凋亡蛋白表达上调,抗凋亡蛋白表达下调(P均<0.05)。结论干扰HOTTIP可使SKOV3细胞的侵袭迁移能力显著下降,使细胞的凋亡增加。

• 单位
  哈尔滨医科大学附属第二医院