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摘要
目的探讨一氧化氮合酶1(NOS1)在宫颈癌干细胞(CCSCs)中的表达水平,并分析NOS1对CCSCs顺铂(Cisplatin, DDP)化疗敏感性的影响及作用机制。方法 qRT-PCR检测NOS1在宫颈癌细胞系HeLa、Siha、Caski及人正常宫颈上皮细胞系Hucec中的表达水平。选择高表达NOS1的宫颈癌细胞培养CCSCs。Western blot检测肿瘤干细胞(CSCs)中Nanog、SOX2、OCT4干性标志蛋白及NOS1的表达。MTS检测宫颈癌细胞和CCSCs对DDP的IC50值。对照siRNA和NOS1 siRNA(si-NOS1)转染CCSCs分为NC组和si-NOS1组,MTS检测两组CCSCs对DDP的IC50值。DDP处理NC组和si-NOS1组CCSCs后流式细胞仪实验检测细胞凋亡,Western blot检测细胞中ABCG蛋白和凋亡相关蛋白的表达。结果 qRT-PCR结果显示NOS1在宫颈癌细胞系中的表达高于在人正常宫颈上皮细胞系Hucec中的表达水平,在HeLa细胞中表达最高(P<0.05)。OCT4、Nanog、SOX2干细胞标志物NOS1在CSCs中表达上调(P<0.05)。MTS检测发现与HeLa细胞相比,CCSCs细胞对DDP的IC50值增加(P<0.05)。MTS检测发现与NC组相比,si-NOS1组CCSCs细胞对DDP的IC50值降低(P<0.05)。DDP处理CCSCs后,与NC组相比,si-NOS1组细胞凋亡率增加,细胞中ABCG2和Bcl-2表达降低,Bax蛋白表达增加(P<0.05)。结论 NOS1在CCSCs中表达增加,NOS1可能通过上调ABCG2调控凋亡相关蛋白降低CCSCs对DDP的化疗敏感性。
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