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摘要
目的：通过对脑缺血再灌注损伤（CIRI）大鼠海马组织环状RNA HDAC2(circHDAC2)表达的研究，探讨针刺抗CIRI的作用机制。方法：SD大鼠随机分为假手术组、模型组、针刺组，每组13只。采用线栓法复制大脑中动脉阻塞再灌注模型。针刺组针刺“大椎”“水沟”“百会”，每次30 min，每隔12 h治疗1次，共7次。干预前后采用改良Garcia评分法评价大鼠神经功能，TTC染色法观察并计算脑梗死面积百分比，基因芯片技术筛选3组大鼠缺血侧海马组织差异表达的环状RNAs(circRNAs)，并筛选模型组/假手术组、针刺组/模型组共同差异表达circRNAs(co-DE circRNAs)，根据P值、差异倍数（FC）、基因本体（GO）条目富集数量筛选出其中的核心circRNAs，通过实时荧光定量PCR法验证其在缺血侧海马组织的表达水平，根据验证结果构建竞争性内源RNA(ceRNA)预测网络，利用实时荧光定量PCR法验证预测网络中节点中心度高的微小RNA(miRNA)和mRNA的表达水平。结果：干预前，与假手术组比较，各造模组大鼠改良Garcia神经功能评分降低（P<0.01）。干预后，与假手术组比较，模型组改良Garcia神经功能评分降低、脑梗死面积百分比升高（P<0.01）；与模型组比较，针刺组改良Garcia神经功能评分升高，脑梗死面积百分比降低（P<0.01）。芯片结果显示：模型组下调和针刺组缺血侧海马组织中上调的co-DE circRNAs为16个，模型组上调和针刺组下调的co-DE circRNAs为7个；根据P值、FC和GO条目富集数量筛选出核心基因circHDAC2和circNTRK2。验证其表达量结果显示，与假手术组比较，模型组大鼠缺血侧海马组织circHDAC2、circNTRK2表达水平下调（P<0.01）；与模型组比较，针刺组大鼠circHDAC2、circNTRK2表达水平均上调（P<0.01）。对circHDAC2构建相关ceRNA调控网络，预测结果显示调控网络中包含miRNA12个、mRNA 31个。对调控网络中节点中心度高的miRNA和与神经系统密切相关的mRNA的验证结果显示，与假手术组比较，模型组大鼠缺血侧海马组织miR-29a、miR-29b、溶质载体家族30成员3(SLC30A3)mRNA表达水平下调（P<0.01）,miR-3065、巯基丙酮酸硫转移酶（MPST）mRNA表达水平上调（P<0.01）；与模型组比较，针刺组大鼠miR-29a、miR-29b、SLC30A3mRNA表达水平上调（P<0.01,P<0.05）,miR-3065表达水平下调（P<0.05）。结论：针刺可提高CIRI大鼠的神经功能、降低脑梗死面积，可能与针刺调控海马circHDAC2/miR-3065/SLC30A3轴有关。
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