DJ-1通过促进EMT进程增强辐照诱导下食管鳞癌细胞的侵袭性

作者：顾俊杰; 朱彩强; 朱作佺; 孙新臣; 张姝^*

来源：南京医科大学学报(自然科学版), 2020, 40(08): 1085-1104.

DOI：10.7655/NYDXBNS20200802

• DJ-1
• 食管鳞癌
• 辐照
• 迁移
• 侵袭

目的:探究敲低DJ-1/PARK7表达及联合辐照对食管鳞癌细胞迁移和侵袭能力的影响及分子机制。方法:利用短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)稳定转染食管鳞癌细胞kyse150和kyse450,敲低DJ-1表达。Western blot检测细胞转染效率。Transwell迁移实验检测梯度辐照(0、4、6、8 Gy)下食管鳞癌细胞的迁移能力。将转染空病毒的对照组(shRNA-Control)与DJ-1敲低组(shRNA-DJ-1)细胞进行6 Gy X线辐照,细胞划痕实验及Transwell迁移侵袭实验检测各组食管鳞癌细胞迁移和侵袭能力。Western blot检测上皮细胞-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)途径相关蛋白上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP2)的表达变化。结果:敲低DJ-1后,食管鳞癌细胞kyse150和kyse450内DJ-1蛋白表达水平明显降低。Transwell迁移实验显示,6 Gy剂量辐照诱导食管鳞癌细胞kyse150和kyse450的迁移能力最强。细胞划痕实验及Transwell迁移侵袭实验显示,在6 Gy辐照条件下敲低DJ-1后kyse150和kyse450细胞迁移和侵袭能力减弱。Western blot显示,敲低DJ-1联合辐照后E-cadherin表达上升,N-cadherin表达下降,MMP2表达下降。结论:敲低DJ-1表达可以降低辐照诱导的食管鳞癌细胞kyse150和kyse450的迁移和侵袭能力,其机制可能与通过上调E-cadherin、下调N-cadherin和MMP2蛋白表达从而抑制细胞EMT进程有关。

• 单位
  南京医科大学第一附属医院