蛋白质组学分析清热解毒法作用于肝癌大鼠的血清蛋白差异表达研究

作者：饶希午; 沈卫星; 陈婷婷; 孙东东; 苗筠杰; 李柳; 孙超; 许宏钦; 程海波^*

来源：中华中医药学刊, 2020, 38(04): 51-261.

DOI：10.13193/j.issn.1673-7717.2020.04.011

• 肝癌
• 清热解毒
• 蛋白组学

目的观察清热解毒法—白花蛇舌草和半枝莲对肝癌大鼠血清蛋白差异表达的影响。方法 40只SD雄性大鼠随机分为正常组(n=10)、模型组(n=10)、清热解毒常规剂量组(n=10)、清热解毒超超高剂量组(n=10)。给予模型组与清热解毒常规剂量组、清热解毒超超高剂量组大鼠0.01%DEN(Sigma,纯度为99.9%,蒸馏水配制)溶液自由饮用8周后,停药2周,期间改为普通喂养,继续给药喂养6周。清热解毒常规剂量组与清热解毒超超高剂量组大鼠于第4周分别给予剂量为4.98、29.88 g·kg-1·d-1的白花蛇舌草、半枝莲水提液灌胃,每周6 d。模型组于第4周同时给予0.9%生理盐水灌胃,1 mL/d,每周6 d。大鼠于第16周灌胃结束后全部处死,取血清样本。将3组血清样本进行TMT肽段标记,质谱鉴定,应用KOBAS软件分析3组差异表达蛋白质的生物信息学。结果共鉴定到1151个蛋白点。模型组与正常组相比,差异表达明显的蛋白共234个,包含上调蛋白151个,下调蛋白83个。清热解毒常规剂量组与模型组相比,差异表达明显的蛋白共216个,包括上调蛋白100个,下调蛋白116个。清热解毒超超高剂量组与模型组相比,差异表达明显的蛋白共208个,包括上调蛋白84个,下调蛋白124个。清热解毒超超高剂量组与清热解毒常规剂量组相比,差异表达明显的蛋白共40个,包括上调蛋白27个,下调蛋白13个;对所有差异表达蛋白对应基因于PUBMED数据库逐一进行检索,发现这些差异表达蛋白主要参与了代谢、炎症反应、免疫调控、自噬、热休克、氧化应激、细胞周期与凋亡、细胞生长与分化、基质降解、血管生成、肿瘤转移、癌相关、肝再生修复等。信号通路分析涉及谷胱甘肽代谢、PPAR代谢等代谢相关通路,T细胞、B细胞、NK细胞激活相关通路,血管新生相关如VEGF信号通路,细胞生长与分化如TGF-β相关通路,Ras、P38 MAPK、Wnt等通路。结论研究证实清热解毒法—白花蛇舌草、半枝莲作用于肝癌大鼠有多靶点,多中心的调控作用。

• 单位
  第一临床医学院; 南京中医药大学; 上海中医药大学附属曙光医院