儿童急性淋巴细胞白血病差异表达基因文库的构建和筛选

任玥; 王彤; 王杰

摘要

目的克隆和分离儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)差异表达基因,探讨小儿白血病的发病机制。方法 Ficoll密度梯度离心法分离单个核细胞,抽取mRNA,逆转录成cDNA;经RsaⅠ酶切,实验组cD-NA被分成两组,分别与两种不同的接头连接后,与对照组cDNA进行两次消减杂交和两次抑制性聚合酶链反应(PCR),提取、纯化PCR产物,与PT-Adv载体连接构建cDNA消减文库,利用PCR扩增、测序和同源性分析差异表达的序列。结果选取文库中60个克隆进行菌落PCR分析,可以检出大小为200～600bp的插入片段。从中随机挑选20个克隆进行测序、生物信息学分析,其中18个克隆与已知基因有高度序列同源性,符...

单位
沈阳医学院

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更新时间：2019-07-15 15:22

儿童急性淋巴细胞白血病差异表达基因文库的构建和筛选

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