氧化葡萄糖酸杆菌启动子的筛选及鉴定

作者：肖苏珂; 杨雪鹏; 魏东芝; 林金萍

来源：中国医药工业杂志, 2010, (09): 654-658.

• 氧化葡萄糖酸杆菌
• 随机启动子库
• 启动子探针质粒
• 特征序列与功能 Gluconobacter oxydans
• random promoter library
• promoter-probe vector
• characteristic sequence and function

利用缺乏启动子的绿色荧光蛋白TFP作为报告基因,与广宿主型质粒pBBR1MCS-5相结合,构建了可在氧化葡萄糖酸杆菌中稳定存在的探针质粒pBBR1MCS5-TFP。利用构建的启动子探针质粒从氧化葡萄糖酸杆菌中分离到多个具有启动子功能的DNA片段——G12、G65、G69和G78,序列测定结果显示G12片段上具有典型的细菌启动子保守序列(-35和-10区)和核糖体结合位点(RBS),将其命名为Lhp启动子。鉴定Lhp在氧化葡萄糖酸杆菌中的启动活性,结果显示该启动子能有效启动异源基因绿色荧光蛋白以及NADH脱氢酶Ⅱ基因的表达。

• 单位
  郑州轻工业大学; 华东理工大学; 生物反应器工程国家重点实验室; 食品与生物工程学院