广东省中山市库蠓形态与分子鉴定

作者:叶雅芳; 刘德星; 李婷婷; 邱德义*; 刘环宇*
来源:中国人兽共患病学报, 2019, 35(11): 1021-1028.

摘要

目的采用形态与分子的鉴定方法对在中山市不同生境采集的库蠓进行鉴定,明确中山市库蠓的种类。方法 2018年4月至2019年3月在中山市采集库蠓样本,采用不损伤外部形态的方法提取基因组DNA,用线粒体细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(COI)基因和线粒体DNA细胞色素b(Cytb)基因特异引物进行PCR扩增和序列测定,用DNAMAN V6和Mega 6.1软件进行构建N-J树。然后将库蠓虫体压片,在体视显微镜下进行形态学鉴定。结果共采集到的104只库蠓,鉴定结果为原野库蠓Culicoides homotomus、苏岛库蠓Culicoides sumatrae、异域库蠓Culicoides peregrinus、琉球库蠓Culicoides actoni、残肢库蠓Culicoides imicola、连斑库蠓Culicoides jacobsoni、抚须库蠓Culicoides palpifer、荒川库蠓Culicoides arakawai、环斑库蠓Culicoides circumscriptus、尖喙库蠓Culicoides oxystoma、霍飞库蠓Culicoides huffi、似同库蠓Culicoides similis等12种。在构建的COI和Cytb NJ树中,12个种均能各自聚为一支,且支持率均达99%,与形态学鉴定结果一致。结论雄性库蠓可根据其尾器进行有效鉴定,分子鉴定为形态鉴定的有效补充。联合形态和分子的鉴定方法可进行库蠓种类的准确鉴定。