5-杂氮-2’-脱氧胞苷对肺癌A549细胞系中SFRP2基因表达以及细胞迁移侵袭的影响

作者：刘双双; 朱正帅; 杨子林

来源：医药论坛杂志, 2022, 43(12): 13-17.

• 分泌型卷曲相关蛋白2
• 去甲基化
• 肺癌A549细胞系
• 细胞迁移
• 细胞侵袭

目的 研究肺癌A549细胞系中5-杂氮-2’-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对分泌型卷曲相关蛋白2基因(SFRP2)甲基和基因表达的影响，以及探究5-Aza-CdR对A549细胞迁移和侵袭的影响。方法 收集2018年至2019年于南阳市中心医院切除的肺癌样本以及相应的癌旁组织，分为肺癌和癌旁组，通过实时定量PCR(qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测SFRP2基因mRNA和蛋白表达水平。甲基化特异性PCR(MSP)法分别检测60例肺癌组和癌旁组中SFRP2基因甲基化水平；采用对肺癌A549细胞系进行去甲基化处理，得到SFRP2基因去甲基化组。未处理肺癌A549细胞系为对照组。对照组和SFRP2基因去甲基化组通过MSP法检测SFRP2基因基因的甲基化状态；采用划痕实验和侵袭迁移小室法(Transwell小室)分别检测肺癌A549细胞系的迁移和侵袭能力；通过qPCR和Western blot检测SFRP2、GSK3β、p-GSK3β、β-catenin和p-β-catenin的mRNA和蛋白表达水平。结果 qPCR和Western blot结果显示，与癌旁组比较，肺癌组中的SFRP2基因的mRNA和蛋白表达量显著降低(P<0.05);MSP结果显示，与癌旁组比较，48例肺癌组的SFRP2基因发生甲基化。MSP结果显示，与对照组比较，SFRP2基因去甲基化组的SFRP2基因甲基化水平显著降低(P<0.05)。划痕实验和Transwell小室结果显示，与对照组比较，SFRP2基因去甲基化组的迁移和侵袭能力显著降低(P<0.05)。qPCR和Western blot结果显示，与对照组比较，SFRP2基因去甲基化组的p-GSK3β、β-catenin的mRNA和蛋白表达显著减少(P<0.05),SFRP2、GSK3β和p-β-catenin的mRNA和蛋白表达显著增多(P<0.05)。结论 SFRP2基因基因去甲基化可以恢复SFRP基因转录表达，阻碍Wnt/β-catenin信号通路，从而抑制肺癌A549细胞系迁移和侵袭能力。

• 单位
  南阳市中心医院