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摘要
目的：建立从质地坚硬的鹿骨中，高效提取具有促进成骨细胞增殖作用活性物质的工艺，并用该工艺提取不同生茸期梅花鹿骨样品，考察提取物促成骨细胞增殖作用效果。方法：采用超高压提取技术，以提取率和总蛋白含量为考察指标利用单因素及正交实验法筛选最佳提取工艺，采用优选工艺提取6月、7月、8月、9月、11月五个不同生茸关键时间点梅花鹿鹿骨样品及牛骨样品，分别作用于小鼠成骨细胞MC3T3-E1，以牛骨为阳性对照样品，考察鹿骨提取物的促成骨细胞增殖效果及不同时间点鹿骨样品促成骨细胞增殖效果的差异。结果：采用单因素及正交实验法考察超高压提取工艺，筛选得到鹿骨提取的最优工艺为提取温度为45℃，料液比为7，保压时间为25min，压力为400MPa；1.25mg/mL浓度组的生茸期关键时间点梅花鹿鹿骨五个不同样品均具有促进MC3T3-E1细胞增殖的功能，与空白对照组及阳性对照组牛骨样品比较均具有显著性差异（P＜0.05或P＜0.01）；对比6月、7月、8月、9月、11月五个时间点样品，6、9、11月份的样品增殖效果明显优于7、8月份样品增殖效果，均具有显著性（P＜0.01）。结论：建立了鹿骨中促进成骨细胞增殖作用活性物质的超高压提工艺；不同生茸期梅花鹿鹿骨均具有显著的促进成骨细胞增殖作用，快速生茸期梅花鹿鹿骨（7月、8月）的促进成骨细胞增殖作用弱于快速生茸前期（6月）、骨化期（9月）和骨化结束期（11月）梅花鹿鹿骨的作用，不同生茸期梅花鹿鹿骨骨密度变化曲线与促成骨细胞增殖曲线呈正相关性。
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