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摘要
[目的]筛选并获得产α-淀粉酶的菌株,并初步研究其酶学性质。[方法]从红树林土壤样品中筛选到一株产α-淀粉酶的菌株约氏黄杆菌HSL13,克隆了其α-淀粉酶基因Fjamy2,构建了p PICZαA-Fjamy2重组表达载体,并在毕赤酵母中表达,然后对该淀粉酶的底物特异性、酶学性质和酶学动力学参数进行了测定。[结果]淀粉酶基因Fjamy2的最适温度为40℃,在10℃～30℃内比较稳定;最适p H为5.0,在p H 5.0～11.0内较稳定;其对多种淀粉底物以及糖原、糊精等均有良好的水解作用;对其动力学进行测定得知Vmax为0.084 1μmol/min,Km为3.35 mg/m L,Kcat为45.35 s-1。[结论]新型淀粉酶Fjamy2在中低温酸性条件下具有优良的活性,最适条件下比酶活为81 U/mg,成功地实现了在毕赤酵母中的异源表达。
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