尼古丁对多种干细胞中烟碱型乙酰胆碱受体表达的影响

作者：邱敏; 李晓红; 黄兹锐; 陈景; 周成斌; 陈寄梅; 庄建

来源：中国病理生理杂志, 2020, 36(07): 1287-1293.

DOI：10.3969/j.issn.1000-4718.2020.07.020

• 尼古丁
• 烟碱型乙酰胆碱受体
• 干细胞

目的:明确干细胞中烟碱型乙酰胆碱受体(nAChRs)亚基的表达以及尼古丁处理后受体改变的情况。方法:选择胚胎、胚胎样干细胞和成体干细胞作为探究对象。采用无饲养层细胞的方法培养人胚胎干细胞系H9和人诱导多能干细胞(IPSC);成体干细胞选择人脐带间充质干细胞(UCMSC)和人骨髓间充质干细胞(BMMSC)。4种细胞传代培养后分成对照组和处理组,处理组培养基中加入尼古丁,分别提取总RNA和蛋白。采用RT-PCR、RT-qPCR和Western blot检测nAChRs亚基的mRNA和蛋白表达水平,采用细胞免疫荧光染色检测受体亚基的表达位置。结果:RT-PCR和Western blot结果显示,H9细胞、IPSC和UCMSC中均检测到nAChRs的α2、α3、α4、α7、α9和β1亚基,而BMMSC仅α4、α7、α9和β1表达明显。尼古丁处理后,RT-qPCR结果显示α2在H9细胞和UCMSC中显著下调,而在IPSC中发生上调;β2在BMMSC和IPSC中显著上调,而在UCMSC中显著下调。结论:胚胎干细胞和成体干细胞中表达的nAChRs亚基不同,且分化潜能越高,表达种类越多。尼古丁对nAChRs亚基的表达调控也存在细胞差异,其中H9细胞对尼古丁的作用表现出高敏感性。

• 单位
  广东省人民医院; 广东省心血管病研究所; 华南理工大学