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摘要
为了了解液泡膜H+-ATPase亚基的分子基础，揭示其在枸杞耐盐碱机制中的作用，本研究以宁夏枸杞为材料，采用TA克隆获得枸杞液泡膜H+-ATPase亚基E like （LbVHA-E like）的基因序列，采用实时荧光定量PCR的方法检测其在不同程度盐胁迫下的表达变化。研究结果显示：该基因全长1 116 bp，开放阅读框为696 bp，编码231个氨基酸，预测分子量约为26.42 kD，等电点7.23；Lb VHA-E like进化关系上与茸毛烟草和番茄的亲缘关系最近。LbVHA-E like蛋白质二级结构由19.05%的随机卷曲、71.43%的α-螺旋和6.93%的延伸主链构成，不存在信号肽、跨膜区，属于一种亲水的不稳定性蛋白，亚细胞定位预测其主要定位于细胞质。实时荧光定量PCR分析结果显示，在盐胁迫初期（24 h），该基因在根和叶中的表达量均高于对照，在低浓度盐胁迫时(100 mmol.L-1)根中的基因表达量均高于对照，由此表明在盐胁迫初期，LbVHA-E like基因可能参与了盐胁迫的Na+离子的排出和区隔化。本研究结果将为LbVHA-E like基因参与宁夏枸杞耐盐分子调控机理的揭示提供理论依据。
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单位生命科学学院; 宁夏大学
